植物赤霉素含量檢測試劑盒-elisa方法
試劑盒性能:
1.樣品線性回歸與預期濃度相關系數(shù)R值為0.95以上。
2.批內(nèi)變異系數(shù)與批間變異系數(shù)應分別小于10%和15% 。
檢測范圍:
3.75 pmol/L - 120 pmol/L
靈敏度:
低檢測濃度小于0.1 pmol/L
實驗原理:
本試劑盒應用雙抗體夾心法測定標本中植物赤霉素(GA)水平。用純化的植物赤霉素(GA)捕獲抗體包被微孔板,制成固相抗體,往包被的微孔中依次加入植物赤霉素(GA),再與HRP標記的檢測抗體結(jié)合,形成抗體-抗原-酶標抗體復合物,經(jīng)過*洗滌后加底物TMB顯色。TMB在HRP酶的催化下轉(zhuǎn)化成藍色,并在酸的作用下轉(zhuǎn)化成終的黃色。顏色的深淺和樣品中的植物赤霉素(GA)呈正相關。用酶標儀在450nm波長下測定吸光度(OD值),通過標準曲線計算樣品中植物赤霉素(GA)含量。
植物標本中相關酶或蛋白的測定:
1、 稱取0.1g(誤差±3%以內(nèi))新鮮植物組織樣本,在液氮中充分研磨;;
2、 加入樣品體積9倍的提取液(pH 7.4 PBS緩沖液),
3、 請于4度,8000rpm,離心30分鐘,取上清并暫時保存于4度待用。
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